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饲料中泛酸的液相色谱(HPLC)检测方案

饲料中泛酸的液相色谱(HPLC)检测方案

泛酸又称为维生素B5,天然存在者为右旋(d)型,合成品多为其钙盐,有d-泛酸钙和dL-泛酸钙(消旋泛酸钙)两种。d-泛酸钙的生物活性为泛酸的91.6%,dL-泛酸钙的生物活性为泛酸的45.8%。

详细介绍

泛酸又称为维生素B5,天然存在者为右旋(d)型,合成品多为其钙盐,有d-泛酸钙和dL-泛酸钙(消旋泛酸钙)两种。d-泛酸钙的生物活性为泛酸的91.6%,dL-泛酸钙的生物活性为泛酸的45.8%。

泛酸在体内是合成辅酶A(CoA)的原料,约占辅酶A分子量的10%。因而泛酸能调节蛋白质、碳水化合物和脂肪的代谢。泛酸对脂肪的合成和分解起着十分重要的作用,具有抗皮肤炎、抑制微生物增殖的作用。

1  仪器与试剂

1.1 仪器设备

LC-600高效液相色谱仪(南京科捷)

C18色谱柱:150mm×4.6mm×5μm

分析天平

超声波水浴

PH计

离心机

针头过滤器

1.2 试剂

磷酸

二水磷酸二氢钠

氢氧化钠

泛酸钙标准工作液

2  试样溶液的制备

复合预A合饲料:称取试样1-2g 或维生素预混合饲料0.25 -0.5g ,精确至0.0001g ,置于100 mL棕色容量瓶中。加60 mL水浸湿,摇匀,加10 mL l%二乙胺四乙酸二钠溶液(4-2)混匀,置于超声波水浴上振荡提取15min。用水定容至刻度混合均匀。过滤或离心。再经0.45µm过滤膜过滤,调整溶液的浓度大于1µg/ml ,供高效液相色谱分析用。

3  色谱条件

色谱柱:Vertex 色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;

流速:1.0mL/min;

温度:室温;

进样量:20μL;

检测波长:200nm。

流动相:磷酸缓冲液。

4  泛酸钙标准高效液相色谱图

饲料中泛酸的液相色谱(HPLC)检测方案(图1)

仪器配置:

型号名称

配置

数量



液相色谱仪LC-600A

(智能全控)


UV600紫外检测器

1台

P600恒流泵(0.001~9.999ml/min)

1台

美国原装进口7725i进样阀(含支架)

1只

100ul进样针

1只

工具包(含管路托盘)

1只

液相色谱柱

250×4 .6,5um   C18进口

1根

分析天平

200g.1mg

1台

酸度计


1台

离心机


1台

JL-120DTH超声波清洗器

加热 3L

1台

KJ330色谱柱温箱

恒温误差±0.1℃

1台

溶剂过滤器

含真空泵

1套

滤膜

有机、水系过滤膜 2盒

有机、水系过滤器 2盒

1套

流动相储液瓶


2只

电脑、打印机


1套

标准品


1套