欢迎访问南京科捷分析仪器有限公司网站!
热线电话:13951657500
食用油中【胆固醇】的凝胶渗透色谱法

食用油中【胆固醇】的凝胶渗透色谱法

【胆固醇检测】目前,有关食品中胆固醇的测定方法主要有气相色谱法,高校液相色谱法,比色法。这些方法都可以完成胆固醇的检测,但样品基质复杂,目标物含量低导致分析结果不理想,而采用凝胶渗透色谱法(GPC)对样品进行前处理,可以有效解决上述问题。

详细介绍

【胆固醇检测】

目前,有关食品中胆固醇的测定方法主要有气相色谱法,高校液相色谱法,比色法。这些方法都可以完成胆固醇的检测,但样品基质复杂,目标物含量低导致分析结果不理想,而采用凝胶渗透色谱法(GPC)对样品进行前处理,可以有效解决上述问题。

凝胶渗透色谱法采用惰性多孔材料为固定相,利用空间排阻效应将分子大小不同的物质分离,达到制备纯化的目的。本文采用全自动凝胶净化系统,提取目标物胆固醇,用高校液相色谱仪进行测定,从而建立一个简单,快捷,准确的食用油中胆固醇的测定方法。

【试剂】

1.胆固醇标品(99%)

2.甲醇(HPLC)

3.乙酸乙酯(分析纯)

4.环己烷(分析纯)

5.石油醚(分析纯)

6.水(超纯水)

【仪器设备】

1.SGPCS-凝胶净化系统

2.凝胶渗透色谱柱

3.高效液相色谱仪(等度)

4.旋转蒸发仪

【含量测定】

标准溶液制备

准确称取胆固醇标准品0.05g,用无水乙醇溶解并定容至 50ml作为标准储备液放置0~4℃冰箱中备用。

胆固醇标准溶液:分别吸取标准储备液(1.0mg/ml)25ul、50ul、100ul、500ul、2000ul,用无水乙醇定容至10ml,现配现用。

试样的制备

分别称取0.5g植物油和0.5g鲜奶,用等体积混合的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂定容至5ml,供后续分离净化使用。抽取试样注入凝胶净化系统,流动相:等体积混合的环己烷和乙酸乙酯溶液,流速:5ml/min,收集7.5-16.5min馏分于试剂瓶中,然后移至旋转蒸发仪中蒸发至干,加入5ml乙醇溶解,供HPLC检测用。

【色谱条件】

色谱柱:C18  250mm*4.6mm  粒度5um

流动相:乙醇

流速:1.0ml/min

紫外检测器波长:208nm

【谱图】

食用油中【胆固醇】的凝胶渗透色谱法(图1)

仪器配置:

型号名称

配置

数量



液相色谱仪LC-600A

(智能全控)


UV600紫外检测器

1台

P600恒流泵(0.001~9.999ml/min)

1台

美国原装进口7725i进样阀(含支架)

1只

100ul进样针

1只

工具包(含管路托盘)

1只

凝胶净化系统


1套

凝胶渗透色谱柱


1根

液相色谱柱

250×4 .6,5um   C18进口

1根

分析天平

200g.1mg

1台

旋转蒸发仪


1台

JL-120DTH超声波清洗器

加热 3L

1台

KJ330色谱柱温箱

恒温误差±0.1℃

1台

溶剂过滤器

含真空泵

1套

滤膜

有机、水系过滤膜 2盒

有机、水系过滤器 2盒

1套

流动相储液瓶


2只

电脑、打印机


1套