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高效液相色谱的日常维护注意事项

发布时间:2020-07-22 13:58:05      发布人:sepu17  浏览量:

高效液相色谱是目前应用较多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。

和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。HPLC日常操作注意事项:

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1、选择流动相时应注意的几个问题:

 

尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。试样在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀并在柱中沉积。

流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时,流动相不应有较强的紫外吸收,一般检测波长应大于流动相的截止波长。

 

2、泵的维护保养:

 

防止任何固体微粒进入泵体,否则会磨损柱塞、密封环缸体和单向阀,因此应预先对流动相进行过滤,可采用Millipore滤膜(0.22μm或 0.45μm )等过滤。泵的入口都应该连接砂滤棒(或片), 输液泵的滤器应经常更换。流动相不应含有任何腐蚀性物质, 含有缓冲液的流动相不应保留在泵内, 尤其是停泵过夜或更长时间。分析工作结束后必须用纯水充分清洗后,再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合固定相,可以是甲醇或甲醇和水)泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、密封环或缸体,产生漏液。输液泵的工作压力不要超过规定的压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。

 

3、紫外检测器维护保养:

 

流通池进入气泡会干扰基线,并极难排出,应使用充分脱气的流动相,以减少气泡的产生。应定期冲洗系统,避免流通池干涸。检测器中氘灯( 光源) 随着使用时间的增加,氘灯强度降低,噪音会不断增大,故分析前柱平衡得差不多时,再打开检测器,分析工作结束及时关闭检测器(频繁开关检测器也会缩短检测器寿命,一般开启间隔少于4小时,不建议关闭检测器)。